苯甲酸在酸性下pH2.5～4.0时，抑菌活性最强，中种不溶于水，添加在碱性条件下，剂含究溶于水，量测理方在食品中添加苯甲酸钠时，定及若食品为酸性食品，前处苯甲酸钠会转变成苯甲酸；山梨酸在乙醇中易溶，法优在水中极微溶解，化研酸性下，糕点不溶于水，中种在碱性条件下，添加溶于水，剂含究在糕点中使用时，量测理方可加入山梨酸，定及也可以加入山梨酸钾；糖精钠易溶于水(1g/1.5mL)，微溶于乙醇(1g/50mL)，耐弱碱性；脱氢乙酸难溶于水，溶于苯、乙醚、丙酮及热乙醇中，但在碱性条件下，溶于水，根据这4组分的性质，本次试验没有同时含有4组分的阳性样品，选择了阴性样品(糕点)进行加标试验，考察了水、1％乙醇(1％氨水)、5％乙醇(1％氨水)、1％氨水、5％甲醇(1％氨水)、10％甲醇(1％氨水)、水-乙酸锌-氢氧化钠7种提取溶剂对4组分峰的影响，称取糕点样品14份，每种提取溶剂平行2份，精密加入混合标准使用液2.0mL，按样品(无奶油蛋糕或面包、辣条、月饼)2g于50mL具塞离心管中，加5％乙醇(含1％氨水)提取，50℃超声20min，冷却至室温，加219g/L亚铁氰化钾、106g/L乙酸锌溶液各2mL，涡旋混匀，于10000r/min离心5min，上清液转移至50mL容量瓶，残渣再提取一次，合并2次滤液，定容至刻度。
取15mL提取液，加10mL正己烷，涡旋5min，离心后，吸取下层过滤上机分析，制备供试品溶液，上机测定，得到色谱图，从图中可以看出水-乙酸锌-氢氧化钠作为提取溶剂，存在峰拖尾现象，而且考虑到后期方法学以及高加入量回收样品导致的色谱峰分离度达不到要求，故不考虑5％甲醇(含1％氨水)、10％甲醇(含1％氨水)；对于含油脂比较大的辣条类糕点，采用水作为提取溶剂，提取效率不明显，故也不考虑水作为提取溶剂。
因此，提取溶剂为1％乙醇(1％氨水)、5％乙醇(1％氨水)、1％氨水，为进一步确定提取溶剂，本试验对这3种提取溶剂进行加标含量测定，称取糕点、月饼、辣条3类样品各3份，精密加入混合标准使用液2.0mL，样品(无奶油蛋糕或面包、辣条、月饼)2g于50mL具塞离心管中，加5％乙醇(含1％氨水)提取，50℃超声20min，冷却至室温，加219g/L亚铁氰化钾、106g/L乙酸锌溶液各2mL，涡旋混匀，于10000r/min离心5min，上清液转移至50mL容量瓶，残渣再提取一次，合并2次滤液，定容至刻度。
取15mL提取液，加10mL正己烷，涡旋5min，离心后，吸取下层过滤上机分析。按上述制备供试品溶液，上机测定，外标法定量计算各组分含量，从表中可知，对于分类为糕点的样品，无论是糕点、月饼还是辣条，当提取溶剂呈偏碱性时，提取率更高，特别是油脂含量高的样品，偏碱性的环境更好的保护这4种目标物的损失，故提取溶剂在5％乙醇(1％氨水)时，样品所得4组分含量都是最高的，综合考虑，提取溶剂选择为5％乙醇(1％氨水)。
将筛选出来的碱性提取溶剂测定pH值，分别为：1％乙醇(1％氨水)pH为9.01～9.15；5％乙醇(含1％氨水)pH为9.04～9.15；1％氨水pH为9.25～9.40。然后用正己烷进行提取，称取糕点样品，经过加标，混合标准使用液3.00mL，理论加标量150mg/kg，试验上机测定，得到4组分含量结果见表4。
从结果中可见，当提取液pH呈酸性时，HLB对目标组分有保留，当呈碱性时，对目标组分保留较低，正己烷萃取1次导致的目标物损失也降低，若萃取2次会使糖精钠与脱氢乙酸的峰更加接近，可能导致分离度达不到要求，且目标物会有损失，故去除提取液中油脂需在碱性条件下进行。
分别精密量取苯甲酸对照品51.28mg置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为2.0471mg/mL的苯甲酸储备液；称取山梨酸对照品51.88mg置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为2.0690mg/mL的山梨酸储备液；称取糖精钠对照品55.10mg置25mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为1.9007mg/mL的糖精钠储备液，糖精钠相对分子质量为205.16，糖精相对分子质量为182.16，两者折算系数为0.8874，故折算为糖精浓度为1.6867mg/mL；称取脱氢乙酸对照品51.71mg置25mL量瓶中，加20g/L氢氧化钠4mL溶解，用水定容至刻度，即得浓度为2.0477mg/mL的脱氢乙酸储备液，对照品储备液5.0mL至100mL容量瓶中，以水定容的混合标准使用液0.00mL、0.1mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL，分别至10mL容量瓶中，加水稀释并定容至刻度，摇匀，即得到标准线性。
按上述色谱条件进行上机测试，以峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标绘制标准线性，得到线性回归方程及相关系数，采用信噪比法评估检测限，利用已知低浓度的分析物样品与空白样品的测量信号进行比较，确定能够可靠检出的最小的浓度，典型的可接受的检出限信噪比是2:1或3:1，结果见表5，图3，4组分线性关系良好，浓度范围覆盖1个数量级，相关系数均大于0.999，浓度范围覆盖了GB2760中要求的限量值(糕点类1.09/kg)满足食品检测要求。表5结果表明，各基质在本试验方法下检测限达到检测要求，且比国标GB5009.28和SG5009.121要低。
声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系
相关链接：脱氢乙酸，氢氧化钠，山梨酸钾，乙酸锌
相关文章：
部分色玻改白玻 弥补华尔润退出空白,行业资讯加快推进质量强区建设 天津市河东区举办“质量月”活动启动仪式国内智慧节能膜及节能玻璃项目落户即墨 ,行业资讯朝令夕改：中欧光伏贸易迷雾重重,行业资讯人工接种内生真菌 给大麦健康生长上保险辽宁抚顺：质量技术帮扶“提质强企”在行动北京东城：打好守护校园食安组合拳西安高新区：推动企业开办3小时办结再提质原创：关于标准GB 5084第二届“玻璃之星”展商颜值投票评选,行业资讯复合益生菌发酵不同基料乳酸菌饮料中挥发性代谢物差异分析（三）钢化玻璃提高度度的原理 普通玻璃有哪些生产工艺,行业资讯玻璃探低回升 延续区间震荡,行业资讯窗户安装哪种玻璃更合适 断桥铝玻璃门窗选购方法,行业资讯餐桌用大理石还是玻璃好 家庭使用玻璃茶几的优点,行业资讯辽宁：现场审查重点用能企业能源计量高、低酰基结冷胶的乳化活性及稳定性（二）宁夏化学分析测试协会关于调味面制品中脱氢乙酸测定高效液相色谱法集团标准征求意见的通知幕墙玻璃要怎样维护保养 玻璃门窗应该怎么做保洁,行业资讯冬季来临 Crocs与Salehe Bembury的联名鞋款继续掀起潮流光大经济权益凭证建材周报2019年第23期：玻璃行业量、价、成本情况,产业数据四川富硒产品检测中心成立玻璃艺术有哪些加工方法 艺术玻璃有哪些加工工艺,行业资讯浴室玻璃用什么清洗方法 浴室玻璃怎么洗才更干净,行业资讯佛山发布全省首个《特殊食品诚信经营单位建设规范》团体标准玻璃背景墙装修要多少钱 家装落地玻璃窗有何好处,行业资讯「黑水泥 2.0」AJ3释出实物图啦 仅为 WMNS 规格第六届知交会暨地博会将于12月9日开幕北卡Air Jordan 17 Low与Air Jordan 9复刻款抢滩登陆Alexis Sablone x Nike SB Dunk Low预计将在秋季登场福建召开专题调研座谈会 推动《福建省实施<消法>办法》修订鳕鱼骨水解蛋白石斛饮料的研制及其稳定性研究（三）钢化玻璃出炉变成波浪形 钢化玻璃有波浪是为什么,行业资讯将重心转移质感 Nike Dunk Low释出新配色The Shoe Surgeon 打造奢感「倒钩」Air Jordan 1 High OG高层建筑用的是什么玻璃 如何擦干净高层楼房玻璃,行业资讯Gentle Monster x BLACKPINK Jennie新联名系列一文看懂3D玻璃热弯工艺,玻璃技术玻璃电较怎么来测定ph值 使用玻璃电较的注意事项,行业资讯工艺玻璃瓶罐的制作步骤 工艺玻璃瓶罐的质量要求,行业资讯